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O objetivo deste trabalho foi fazer o levantamento da presença de genes codificadores para fatores de virulência para mastite em 122 isolados pertencentes a 34 espécies diferentes de Bactérias do Ácido Lático (BAL) isoladas de leite cru obtido de vacas individuais e de tanque de expansão refrigerado em 5 fazendas produtoras do Queijo Minas Artesanal Canastra, utilizando a técnica de PCR, seguida de resolução dos produtos em eletroforese em gel de agarose corado com Brometo de etídeo. Em doze isolados foi encontrada a presença do gene codificador do fator de virulência gelE e, em seis deles simultaneamente a presença dos genes codificadores dos fatores de virulência efa e cad. Porém, a grande maioria dos isolados, isto é 110 deles não apresentaram nenhum dos três fatores de virulência aqui avaliados, apresentando potencial uso seguro em bovinos de leite. Os resultados obtidos neste estudo contribuem para selecionar e caracterizar novas linhagens de BAL com potencial probiótico para o controle da mastite.